GenElute HP Select Plasmid Gigaprep Kit 可以简单、快速、低成本的从重组大肠杆菌培养物中分离不含内毒素的质粒DNA。在收集细胞后2小时内,可从1.2-2.5 L Luria Broth (LB)培养基或600 mL-1.2 L of Terrific Broth (TB)培养基内的大肠杆菌培养物中纯化出多达15 mg内毒素水平≤ 0.1 EU/μg高拷贝数质粒DNA。请注意,实际得率取决于所用的菌株、质粒和培养基。
通过离心分离法收集过夜的重组大肠杆菌培养液,然后通过改性SDS 碱裂解法进行处理。过滤澄清裂解液,然后加入针对无内毒素质粒制备而优化的结合缓冲液。随后,质粒在高盐环境下捕获到硅胶膜上,同时避免内毒素吸附到膜上。通过三遍洗涤步骤,去除污染物。最后,在不含内毒素的水中洗脱结合所得的DNA。
此类DNA可直接供进行内毒素敏感细胞的限制性酶切、克隆、测序、PCR和转染等应用。
象形图 |
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警示语 |
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Class |
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警告声明 |
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UNub |
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危险声明 |
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Packing Group |
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